首页 >  知识中心 >  新闻详情

1×sds上样缓冲液 SDS上样缓冲液(5*)作用是什么

来源:朵拉利品网  |  2020-12-04 07:48:00

1, SDS上样缓冲液(5*)作用是什么



5*SDS-PAGE Loading Buffer的配制(10 ml)
(本方案摘自《蛋白质技术手册》汪家政、范明)
组分:Tris-HCl pH6.8(60 mM);SDS (2%);溴酚兰(0.1%);甘油(25%);β-巯基乙醇(14.4 mM)
配制过程:
1. 量取1M Tris-HCl (pH6.8) 0.6 ml;50%的甘油5 ml;10%的SDS溶液2 ml;1%的溴酚兰1 ml;
2. 加入去离子水定容至10 ml;
3. 分装;
4. 在4℃可保存数周,-20℃可保存数月之久。
你还可以参考下面这个配方:
2*SDS凝胶加样缓冲液 组分(摘自《分子克隆》第三版)
Tris-HCl pH6.8(100 mM);SDS (4%);溴酚兰(0.2%);甘油(20%);β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(200 mM)
不含硫代试剂的加样Buffer可在室温保存。β-巯基乙醇或二硫苏糖醇临用前加入。

2, 请教:2*SDS上样缓冲液的配法



loading buffer 的中文名字叫上样缓冲液,6kb的缓冲液中可以显示两条带,前面的紫蓝色的条带是溴酚蓝,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同。
后面的蓝色条带是二甲苯氰,它在1%和1.4%琼脂糖中电泳时,其迁移速率分别与2Kb和1.6Kb的双链线性DNA大致相似。而对于PAGE胶他们的迁移速率也分别不同。
pH计算
提到
这就是Henderson-Hasselbalch方程。
值得注意的是,式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度,除了酸性过于强的情况下,由于同离子效应的存在,一般都可用此式计算,
根据此式可得出下列几点结论:
1、缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定,但酸和盐的比例不同时,就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时,溶液的pH值与PKa值相同。
2、酸和盐浓度等比例增减时,溶液的pH值不变。
3、酸和盐浓度相等时,缓冲液的缓冲效率为最高,比例相差越大,缓冲效率越低,缓冲液的一般有效缓冲范围为pH=pKa±1,pOH=pKb±1。
配制方法
只要知道缓冲对的PH值,和要配制的缓冲液的pH值(及要求的缓冲液总浓度),就能按公式计算[盐]和[酸]的量。这个算法涉及对数换算,较麻烦,前人为减少后人的计算麻烦,已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系并列出了表格。
只要我们知道要配制的缓冲液的pH,经查表便可计算出所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nm pH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。
经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L),而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml 0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升,而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。
计算好后,按计算结果准确称好固态化学成分,放于烧杯中,加少量蒸馏水溶解,转移入50ml容量瓶,加蒸馏水至刻度,摇匀,就能得到所需的缓冲液。
各种缓冲溶液的配制,均按表格按比例混合,某些试剂,必须标定配成准确浓度才能进行,如醋酸、氢氧化钠等。另外,所有缓冲溶剂的配制计量都能从以上的算式准确获得。
参考资料来源:百度百科-缓冲溶液
参考资料来源:百度百科-上样缓冲液

名词解释


ml

ML,monolayer的缩写,是覆盖度的单位。

SDS

抑郁自评量表(Self-ratingdepressionscale,SDS)是含有20个项目,分为4级评分的自评量表,原型是W.K.Zung编制的抑郁量表(1965年)。其特点是使用简便,并能相当直观地反映抑郁患者的主观感受及其在治疗中的变化。主要适用于具有抑郁症状的成年人,包括门诊及住院患者。但对严重迟缓症状的抑郁,评定有困难。同时,SDS对于文化程度较低或智力水平稍差的人使用效果不佳。

mM

mm即毫米的英文缩写,又称公厘(或公釐),是长度单位和降雨量单位。1毫米等于千分之一米,或十分之一厘米。

 
相关新闻
大宝sod蜜 大宝sod蜜的主要功效是什么啊? 12-07
阿希莫蓝牙音箱ds1168 阿西莫DS 02-02
SSD SSD和SATA 的区别 02-21
240g ssd价格 ssd固态硬盘 240g 多少钱 02-27
ssd硬盘和hdd硬盘区别 SSD和HDD的区别是什么 02-27
固态硬盘 ssd固态硬盘 必要吗 02-27
ssd价格曲线 请教:SSD固态硬盘的价格曲线未来可能会怎样 02-27
固态硬盘和ssd哪个好 SSD固态硬盘与原来的硬盘哪个好? 02-27
ssd好还是固态硬盘 SATA和固态硬盘哪个好? 02-27
ssd价格失控 同容量SSD的价格差在哪里呢? 02-27
相关产品
铰链阻尼缓冲液压铰链飞机烟斗橱柜衣柜 橱柜铰链七片力臂 05-14
cds-1510uf控制器,CDS驱动器 机床驱动器CDS-0510UF 06-12
独家代理整体衣柜品牌诚征江阴衣柜门店加盟店免费上样 06-15
独家代理整体衣柜品牌诚征兴义装饰公司加盟店免费上样 06-15
马达调速器SS22L SS22M SS21M SS21L SS21M-SSSD SS32-HR 06-21
专业Business( PA6) 1010C2(2) 台湾DSM 06-21
施耐德同款SM4-NSC100ROTDS(JDS-5)机械联锁 加工中心开门断电 06-22
DS钢模具钢 DS钢成分及价格 07-01
供应山推SD13山推SD13单边支重轮 07-12
供应山推SD13/SD16/SD22D等山推单边支重轮 07-12

大家都在看