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1×sds上样缓冲液配制 sds电泳上样缓冲液如何配置

来源:朵拉利品网  |  2020-12-04 07:48:41

1, sds电泳上样缓冲液如何配置



5*SDS-PAGE Loading Buffer的配制(10 ml)
(本方案摘自《蛋白质技术手册》汪家政、范明)
组分:Tris-HCl pH6.8(60 mM);SDS (2%);溴酚兰(0.1%);甘油(25%);β-巯基乙醇(14.4 mM)
配制过程:
1. 量取1M Tris-HCl (pH6.8) 0.6 ml;50%的甘油5 ml;10%的SDS溶液2 ml;1%的溴酚兰1 ml;
2. 加入去离子水定容至10 ml;
3. 分装;
4. 在4℃可保存数周,-20℃可保存数月之久。
你还可以参考下面这个配方:
2*SDS凝胶加样缓冲液 组分(摘自《分子克隆》第三版)
Tris-HCl pH6.8(100 mM);SDS (4%);溴酚兰(0.2%);甘油(20%);β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(200 mM)
不含硫代试剂的加样Buffer可在室温保存。β-巯基乙醇或二硫苏糖醇临用前加入。

2, SDS上样缓冲液作用



(以下内容仅供参考)
2乘SDS-PAGE上样缓冲液(20ml体系)
1.0mol/L Tris-HCL (pH 6.8) 2ml
1.0mol/L DTT 4ml
SDS 0.8g
溴芬蓝 0.04g
甘油 4ml
dd水 定容至20ml
4℃冰箱保存,可以不分装,我们实验室一般用三个月以上
先配1.0mol/L的DTT,双蒸无菌水溶解4℃冰箱保存,配上样缓冲液的时候加入就可以了,都混匀保存也没问题的

名词解释


ml

ML,monolayer的缩写,是覆盖度的单位。

SDS

抑郁自评量表(Self-ratingdepressionscale,SDS)是含有20个项目,分为4级评分的自评量表,原型是W.K.Zung编制的抑郁量表(1965年)。其特点是使用简便,并能相当直观地反映抑郁患者的主观感受及其在治疗中的变化。主要适用于具有抑郁症状的成年人,包括门诊及住院患者。但对严重迟缓症状的抑郁,评定有困难。同时,SDS对于文化程度较低或智力水平稍差的人使用效果不佳。

mM

mm即毫米的英文缩写,又称公厘(或公釐),是长度单位和降雨量单位。1毫米等于千分之一米,或十分之一厘米。

 
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