2, 苏木精 伊红染色的注意事项
染色时应注意事项 在进行HE染色时还应注意以下问题： 1.组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则无论进行那种染色都会发生困难。脱蜡时间要充分，若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低，若室温过低，可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡。 2.苏木素染液使用一段时间后表面易出现亮晶状飘浮物，这可能是液体表面的过氧化物，必须过滤除去，以防沉渣污染组织切片。苏木素液一般染过三、四百张切片后，着色力会减弱，着色不鲜艳，呈灰蓝色时应及时更换新液。 3.染色的时间长短需依据：染剂对组织的染色作用，室温条件，切片厚薄，固定液的类别，染液的新旧而进行调节。所以在染色时必须使用显微镜观察染色程度以利掌握时间。 4.分化十分重要。分化步骤的准确也是染色成败的关键，若分化失当则必然引起染色不匀或过淡，过深等现象，因此分化后一定要镜检，观察胞核是否清晰，胞浆呈淡白色。否则需再次分化，不然一旦复染后，组织会呈紫蓝色即“蓝盖红”现象。 5.还原液不宜过浓，若碱性太强易使组织脱落故以淡为宜。 6.伊红宜淡染，复染过深胞核会不清晰，影响镜检。 7.若脱水，透明等步骤不够彻底，则组织表面会有一层雾状膜。若有这一现象，应立即更换纯酒精脱水，再次透明。在潮湿的季节里应注意酒精的浓度、若降低要及时更换。 8.染色后的组织切片、要将组织四周的污染物痕迹擦掉，以免影响美观。 9.封固剂要适量，滴加时应小心倾滴，盖玻片要轻轻放置，以免气泡产生影响镜检。盖玻片大小选择要合适，一般要大于组织块，以防封盖不全，盖玻片要放正，标签贴牢，编号清楚。从而保证切片的封藏和美观。 10.染好的切片应妥为保存，更应避免日光照射，否则切片容易褪色。
3, 亚甲蓝的染料
好不好用，要用过才知道啊。试剂盒说明：苏木精-伊红染色法 （ Hematoxylin-Eosin staining ），简称HE染色法 ，是病理学常规制片中最基本的染色方法。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。 染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。 本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。操作说明（以下步骤仅供参考）：（一）石蜡组织切片染色。1.取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。2.石蜡切片脱蜡水化：二甲苯（I）中脱蜡5min。换用新鲜的二甲苯（Ⅱ），再脱蜡5min。无水乙醇5 min。95%乙醇2min。80%乙醇2min70%乙醇2min。蒸馏水2min。3.苏木素染液染色5-20min（具体时间根据染色结果和实验要求调整），自来水冲洗。4.分化液分化30s。5.自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min。6.置伊红染液2min（具体时间根据染色结果和实验要求调整），自来水冲洗。7.自来水浸泡5min。8.脱水，透明，封片：95%乙醇（I）1min95%乙醇（Ⅱ）1min③100%乙醇（I）1min100%乙醇（Ⅱ）1min二甲苯石炭酸（3:1）1min二甲苯（I）1min二甲苯（Ⅱ）1min中性树胶封固，镜下观察。（二）冰冻切片冰冻切片不用脱蜡，可固定后直接染色，其方法与石蜡切片相同。注意事项：1、切片脱蜡应尽量干净。2、系列乙醇应经常更换新液。3、第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。4、染色过程推荐浅染，通常只需能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞质颜色。5、冷冻切片染色时间尽量要短。6、染色时的pH值很重要。苏木素中矾类，太少会使核染偏红，太多会造成染色弥散。需要严格按照配方进行配置。7、放置时间过长的苏木素染液需要过滤后才能使用，否则容易造成分色效果不好。8、如果染色效果不好，可以加适量的冰醋酸增强细胞质着色，该操作具有一定副作用，染好的片子会随着时间延长而褪色。9、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
名词解释
染色
染色又称为上色，指用化学或其他方法影响物质本身而使其着色。天然染色有时需要用媒染剂，合成染色也需要使用一些助剂；通过染色可以使物体呈现出人们所需要的各种颜色，用五颜六色来装点生活。
伊红
伊红(eosin)为酸性染料，将细胞质和细胞间质染为粉红色·切片在染色前需要脱蜡，染色后用中性树胶或DPX封片，以便长期保存 ，伊红是一种红色酸性染料．在微生物学实验中，用于鉴别产酸性细菌的一种培养基添加剂。 2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，伊红在3类致癌物（尚无足够证据确定是否致癌）清单中。
