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苏木素伊红染色 碧云天的苏木素伊红染色试剂盒好用吗

来源:朵拉利品网  |  2021-04-13 03:07:43

1, 碧云天的苏木素伊红染色试剂盒好用吗



好不好用,要用过才知道啊。
试剂盒说明:
苏木精-伊红染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining ),简称HE染色法 ,是病理学常规制片中最基本的染色方法。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。 染色过程需要优化,着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。 本产品所包含试剂均为工作液,可直接使用。
操作说明(以下步骤仅供参考):
(一)石蜡组织切片染色。
1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,切片。
2.石蜡切片脱蜡水化:
二甲苯(I)中脱蜡5min。
换用新鲜的二甲苯(Ⅱ),再脱蜡5min。
无水乙醇5 min。
95%乙醇2min。
80%乙醇2min
70%乙醇2min。
蒸馏水2min。
3.苏木素染液染色5-20min(具体时间根据染色结果和实验要求调整),自来水冲洗。
4.分化液分化30s。
5.自来水浸泡15min或温水(约50℃)5min。
6.置伊红染液2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整),自来水冲洗。
7.自来水浸泡5min。
8.脱水,透明,封片:
95%乙醇(I)1min
95%乙醇(Ⅱ)1min
③100%乙醇(I)1min
100%乙醇(Ⅱ)1min
二甲苯石炭酸(3:1)1min
二甲苯(I)1min
二甲苯(Ⅱ)1min
中性树胶封固,镜下观察。
(二)冰冻切片
冰冻切片不用脱蜡,可固定后直接染色,其方法与石蜡切片相同。
注意事项:
1、切片脱蜡应尽量干净。
2、系列乙醇应经常更换新液。
3、第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
4、染色过程推荐浅染,通常只需能够分辨细胞核即可,颜色过深有可能影响细胞质颜色。
5、冷冻切片染色时间尽量要短。
6、染色时的pH值很重要。苏木素中矾类,太少会使核染偏红,太多会造成染色弥散。需要严格按照配方进行配置。
7、放置时间过长的苏木素染液需要过滤后才能使用,否则容易造成分色效果不好。
8、如果染色效果不好,可以加适量的冰醋酸增强细胞质着色,该操作具有一定副作用,染好的片子会随着时间延长而褪色。
9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2, 苏木精 伊红染色的注意事项



染色时应注意事项
在进行HE染色时还应注意以下问题:
1.组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则无论进行那种染色都会发生困难。脱蜡时间要充分,若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低,若室温过低,可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡。
2.苏木素染液使用一段时间后表面易出现亮晶状飘浮物,这可能是液体表面的过氧化物,必须过滤除去,以防沉渣污染组织切片。苏木素液一般染过三、四百张切片后,着色力会减弱,着色不鲜艳,呈灰蓝色时应及时更换新液。
3.染色的时间长短需依据:染剂对组织的染色作用,室温条件,切片厚薄,固定液的类别,染液的新旧而进行调节。所以在染色时必须使用显微镜观察染色程度以利掌握时间。
4.分化十分重要。分化步骤的准确也是染色成败的关键,若分化失当则必然引起染色不匀或过淡,过深等现象,因此分化后一定要镜检,观察胞核是否清晰,胞浆呈淡白色。否则需再次分化,不然一旦复染后,组织会呈紫蓝色即“蓝盖红”现象。
5.还原液不宜过浓,若碱性太强易使组织脱落故以淡为宜。
6.伊红宜淡染,复染过深胞核会不清晰,影响镜检。
7.若脱水,透明等步骤不够彻底,则组织表面会有一层雾状膜。若有这一现象,应立即更换纯酒精脱水,再次透明。在潮湿的季节里应注意酒精的浓度、若降低要及时更换。
8.染色后的组织切片、要将组织四周的污染物痕迹擦掉,以免影响美观。
9.封固剂要适量,滴加时应小心倾滴,盖玻片要轻轻放置,以免气泡产生影响镜检。盖玻片大小选择要合适,一般要大于组织块,以防封盖不全,盖玻片要放正,标签贴牢,编号清楚。从而保证切片的封藏和美观。
10.染好的切片应妥为保存,更应避免日光照射,否则切片容易褪色。

名词解释


染色

染色又称为上色,指用化学或其他方法影响物质本身而使其着色。天然染色有时需要用媒染剂,合成染色也需要使用一些助剂;通过染色可以使物体呈现出人们所需要的各种颜色,用五颜六色来装点生活。

组织

组织即由若干个人或群体所组成的、有共同目标和一定边界的社会实体。它包含三层意思:(1)组织必须是以人为中心,把人、财、物合理配合为一体,并保持相对稳定而形成的一个社会实体。(2)组织必须具有为本组织全体成员所认可并为之奋斗的共同目标。(3)组织必须保持一个明确的边界,以区别于其他组织和外部环境。上述三条,是组织存在的必要条件。

 
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