1, 苏木精
苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。1、苏木精:苏木精是染细胞核的优良材 料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。它是淡黄色到锈紫色的结晶体,难溶于冷水和乙醚和甘油,易溶于热水和热酒精,溶于碱、氨和硼砂的溶液,分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色 ,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。2、伊红:伊红(eosin)为酸性染料,将细胞质和细胞间质染为粉红色·切片在染色前需要脱蜡,染色后用中性树胶或DPX封片,以便长期保存 ,伊红是一种红色酸性染料.在微生物学实验中,用于鉴别产酸性细菌的一种培养基添加剂。苏木精 -伊红染色结果分析:细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。参考资料来源:百度百科-苏木精参考资料来源:百度百科-伊红
2, 苏木精 伊红染色的注意事项
染色时应注意事项 在进行HE染色时还应注意以下问题: 1.组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则无论进行那种染色都会发生困难。脱蜡时间要充分,若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低,若室温过低,可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡。 2.苏木素染液使用一段时间后表面易出现亮晶状飘浮物,这可能是液体表面的过氧化物,必须过滤除去,以防沉渣污染组织切片。苏木素液一般染过三、四百张切片后,着色力会减弱,着色不鲜艳,呈灰蓝色时应及时更换新液。 3.染色的时间长短需依据:染剂对组织的染色作用,室温条件,切片厚薄,固定液的类别,染液的新旧而进行调节。所以在染色时必须使用显微镜观察染色程度以利掌握时间。 4.分化十分重要。分化步骤的准确也是染色成败的关键,若分化失当则必然引起染色不匀或过淡,过深等现象,因此分化后一定要镜检,观察胞核是否清晰,胞浆呈淡白色。否则需再次分化,不然一旦复染后,组织会呈紫蓝色即“蓝盖红”现象。 5.还原液不宜过浓,若碱性太强易使组织脱落故以淡为宜。 6.伊红宜淡染,复染过深胞核会不清晰,影响镜检。 7.若脱水,透明等步骤不够彻底,则组织表面会有一层雾状膜。若有这一现象,应立即更换纯酒精脱水,再次透明。在潮湿的季节里应注意酒精的浓度、若降低要及时更换。 8.染色后的组织切片、要将组织四周的污染物痕迹擦掉,以免影响美观。 9.封固剂要适量,滴加时应小心倾滴,盖玻片要轻轻放置,以免气泡产生影响镜检。盖玻片大小选择要合适,一般要大于组织块,以防封盖不全,盖玻片要放正,标签贴牢,编号清楚。从而保证切片的封藏和美观。 10.染好的切片应妥为保存,更应避免日光照射,否则切片容易褪色。
名词解释
伊红
伊红(eosin)为酸性染料,将细胞质和细胞间质染为粉红色·切片在染色前需要脱蜡,染色后用中性树胶或DPX封片,以便长期保存 ,伊红是一种红色酸性染料.在微生物学实验中,用于鉴别产酸性细菌的一种培养基添加剂。 2017年10月27日,世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考,伊红在3类致癌物(尚无足够证据确定是否致癌)清单中。
苏木
苏木(学名:Caesalpinia sappan Linn.,又名:赤木),豆科苏木属植物。其主要分布于中国广西、广东、中国台湾、贵州、云南及四川等地。 其为常绿小乔木,高可达5~10米,具疏刺;羽片对生,长8~12厘米,小叶紧靠,无柄,长圆形至长圆状菱形,先端微缺,基部歪斜,以斜角着生于羽轴上;侧脉纤细,在两面明显,至边缘附近连结;圆锥花序顶生或腋生,长约与叶相等;苞片大,披针形,早落;花梗被细柔毛;花托浅钟形;花瓣黄色,阔倒卵形;种子3~4颗,长圆形,稍扁,浅褐色;花期5-10月,果期7月-翌年3月。苏木喜温暖湿润气候。
染色法
染色法(英文名:staining test),一种分析鉴定岩矿的方法。