1, 苏木精
染色时应注意事项 在进行HE染色时还应注意以下问题: 1.组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则无论进行那种染色都会发生困难。脱蜡时间要充分,若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低,若室温过低,可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡。 2.苏木素染液使用一段时间后表面易出现亮晶状飘浮物,这可能是液体表面的过氧化物,必须过滤除去,以防沉渣污染组织切片。苏木素液一般染过三、四百张切片后,着色力会减弱,着色不鲜艳,呈灰蓝色时应及时更换新液。 3.染色的时间长短需依据:染剂对组织的染色作用,室温条件,切片厚薄,固定液的类别,染液的新旧而进行调节。所以在染色时必须使用显微镜观察染色程度以利掌握时间。 4.分化十分重要。分化步骤的准确也是染色成败的关键,若分化失当则必然引起染色不匀或过淡,过深等现象,因此分化后一定要镜检,观察胞核是否清晰,胞浆呈淡白色。否则需再次分化,不然一旦复染后,组织会呈紫蓝色即“蓝盖红”现象。 5.还原液不宜过浓,若碱性太强易使组织脱落故以淡为宜。 6.伊红宜淡染,复染过深胞核会不清晰,影响镜检。 7.若脱水,透明等步骤不够彻底,则组织表面会有一层雾状膜。若有这一现象,应立即更换纯酒精脱水,再次透明。在潮湿的季节里应注意酒精的浓度、若降低要及时更换。 8.染色后的组织切片、要将组织四周的污染物痕迹擦掉,以免影响美观。 9.封固剂要适量,滴加时应小心倾滴,盖玻片要轻轻放置,以免气泡产生影响镜检。盖玻片大小选择要合适,一般要大于组织块,以防封盖不全,盖玻片要放正,标签贴牢,编号清楚。从而保证切片的封藏和美观。 10.染好的切片应妥为保存,更应避免日光照射,否则切片容易褪色。
2, 苏木精 伊红染色的注意事项
Delafield 苏木精材料:苏木素4g、无水酒精25ml、10%铵矾水溶液400ml、甘油100ml、甲醇100ml、蒸馏水配置方法:(1)取10g铵矾溶于90ml蒸馏水中,即成10%铵矾水溶液;(2)取苏木精4g溶于无水酒精25ml;(3)溶化后加10%铵矾水溶液400ml,放有光处3-4天;(4)滤过后加甘油及甲醇各100ml,过滤数日后可长久保存。用法:一般用蒸馏水稀释50-100倍,染4-24小时,后流水洗。
名词解释
蒸馏水
蒸馏水是指经过蒸馏、冷凝操作的水,蒸二次的叫重蒸水,三次的叫三蒸水。 蒸馏水的制作是把源水煮沸后令其蒸发冷凝回收,要大量耗费热能,造价不会太低。
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