1, 液相色谱仪的高压泵在工作,但响声大。不出液,为什么？
赶快停掉。可能是你之前用的流动相里面有盐，因为冲洗干净盐析了。在泵头位置、单向阀的位置有盐的颗粒，这样摩擦可能会损伤仪器。不知道你是什么仪器，先去把泵前的单向阀卸下来，用纯水超声10min。然后把它们装上，打开purge阀，看看是不是泵液。如果还不泵液，可以把溶剂过滤头（就是插在流动相里面的那个东西）拔掉，用注射器推一管甲醇水。然后冲洗一段时间的甲醇水看看情况。一般来说，如果盐浓度比较大的流动相，事后要多冲洗一段时间。不然很容易盐析的。
2, 安捷伦1100液相色谱仪流动相没了怎么办
跑空了吗？主要是看有没有进气泡。你可以打开purge阀，然后排气。安捷伦通常都说流速是3ml/min的时候压力不超过5bar。如果超了，在purge阀里面有一个过滤白头，把那个换掉应该就可以。然后维持排气的状态10min，保证柱前没有气泡。色谱柱可能有一点损伤，用甲醇水冲干净之后冲一会儿甲醇，把柱子里面的样品冲掉。我用安捷伦1260跑空过半宿，不过换了个过滤白头就没事儿了。不用太着急。
3, 液相色谱仪的使用方法以及注意事项有哪些？！
高效液相色谱仪操作步骤： 1）.过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。 2）.对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3）.打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。 4）.进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。 5）.有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10 ml/min。 6）.调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。7）.设计走样方法。点击file，选取select users and methods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击new method。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟；b.基线归零；c.进样阀的loading-inject转换；d.走样时间，随不同的样品而不同。 8）.进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。 9）.关机时，先关计算机，再关液相色谱。 10）.填写登记本，由负责人签字。 高效液相色谱仪使用注意事项： 1、泵正常工作时，在流动相和流速不变的前提下柱压应该是稳定的，当然在换流动相时压力变化是正常的，正常情况下如果柱压升高基本上都是由色谱柱使用时间长引起的（只有更换色谱柱），如果正常情况下压力突然降低有可能是（1）接头处有漏液的地方，采取的方法是有滤纸检查，如有漏液的地方用扳手拧紧即可。如果没有漏液则可能是（2）白色的管子里面有气泡从而导致流动相进不到泵里面去，采取的方法是排气泡排气时：先STOP停泵—打开排气阀—按PURGE（快冲）键—等气泡排完后先STOP停泵—拧紧排气阀，其先后步骤不要搞反了。 2、泵正常工作时最高压力最好不要超过200KG，所以打开泵以后可以将泵的最大压力调到200KG，这样如果压力超过上限则会自动报警停机，流速最好不用超过1ML/MIN，如果使用时压力超过200KG，建议将流速调低点以降低压力（在色谱柱正常的情况下），如果是因为色谱柱长时间使用造成压力升高则建议更换色谱柱（因为色谱属于耗材长时间使用就需要更换，更换的主要依据色谱柱出峰不正常或者柱压力过高）。 3、泵正常工作时平均每15天左右向注油孔加润滑油2~3滴。 4、流动相里面如果有盐或酸类，做完实验后要先用95%二次蒸馏水与5%甲醇洗色谱柱40分钟左右，然后用纯甲醇洗30分钟左右才可以关机。第二天如果继续做实验流动相里面仍旧有盐或酸类，最好先用95%二次蒸馏水与5%甲醇过度20分钟，再用流动相。如果流动相里面只有甲醇，水，乙腈。做完实验后就不用95%二次蒸馏水5%甲醇冲洗，可直接用纯甲醇洗30分钟即可关机。 5、C18色谱柱的耐酸PH值范围3—8使用时不要超出。 6、仪器长期不用时一定要将滤头泡在甲醇里半月开机一次，如果开机时泵抽不上液可以打开排气阀按PURGE快冲。 7、调反压器时要注意等液体流出来以后才能调一般调8—10KG，比如现在泵显示屏显示柱压50KG那再增加10KG显示屏上显示柱压60KG然后拧紧锁紧螺母。 8、色谱仪关机顺序：清洗液路时可以把检测器直接关机，清洗结束后先按STOP让泵停止后在关电源不允许直接关机。
4, 如何解决液相色谱仪进样阀引起的鬼峰
一般进样阀上的鬼峰都是因为没有洗干净导致的。最简单的办法就是换一个定量环。然后其他的地方全部拆开，清洗部件。不过如果没有拆过六通的经验，就不要拆了。因为内部的构造有点儿复杂，万一装不上就比较麻烦了。不会拆的话，你只能用5ml或者10ml的大号进样针大量地推注清洗，而且每次推一管就要上下搬进样阀一两次。反相色谱，我一般先用3%的稀硝酸（千万别连柱子啊）洗四五管去掉无机盐，然后换甲醇洗四五管溶解，然后换成异丙醇，异丙醇的粘度很大，可以把一些东西带下来。所以用异丙醇清洗的时候要慢一点。最好是知道里面残留的东西是什么，这样洗起来比较容易。有一次，我们同事进的样品只溶于乙酸乙酯，我大概推注了100ml的乙酸乙酯才把那东西洗出来的。这个情况比较特殊，希望你没有遇到这种事情。
相关概念
盐析
盐析(salting out)是指在蛋白质水溶液中加入中性盐，随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。 中性盐是强电解质，溶解度又大，在蛋白质溶液中，一方面与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。常用的中性盐有硫酸铵、‘氯化钠、硫酸钠等，但以硫酸铵为最多。得到的蛋白质一般不失活，一定条件下又可重新溶解，故这种沉淀蛋白质的方法在分离、浓缩，贮存、纯化蛋白质的工作中应用极广。
冲洗
冲洗滤池时，单位层冲洗一次所耗用时间内通过的水量。其计量通常以L/(m2.s)表示。
