1, 核苷酸和核糖核苷酸的区别是什么?好评。
核苷酸分为脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸。核苷酸是核苷和磷酸结合的化学物质,其中核苷一磷酸是有代表性的一系列品种。多个核苷酸连接成锁状的物质由其含有核苷酸的数量分为寡核苷酸(15个或少于15个核苷酸)和多核苷酸(15个核苷酸以上),后者也是构成DNA(去氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)的单位,生物的细胞中都存在。核糖核苷酸是由一个磷酸核糖(另一种五碳糖)含N碱基构成的。核糖核苷酸分成腺嘌呤核糖核苷酸鸟嘌呤核糖核苷酸胞嘧啶核糖核苷酸尿。脱氧核糖核苷酸是组成脱氧核糖核酸的基本单位。核苷酸是核酸最小的活性分子,由碱基-脱氧核糖(核糖)-磷酸,而核酸是由四种核苷酸通过化学键组成的双螺旋结构,就是通常意义上的DNA。
2, 寡核苷酸的具体定义是什么?
四种核苷酸或脱氧核苷酸按照一定的排列顺序以3",5"磷酸二酯键(phosphodiester linkage)相连形成的多聚核苷酸链或脱氧核苷酸(polydeoxynucleotides), 称为核苷酸序列(也称为碱基序列)。脱氧核苷酸或核苷酸的连接具有严格的方向性,是前一核苷酸的3"-OH与下一位核苷酸的5"-位磷酸间形成3",5"磷酸二酯键,构成一个没有分支的线性大分子。DNA的书写应从5"到3"大多数的真核mRNA转录后在5\"-端加一个7-甲基鸟苷,同时第一个核苷酸的C\"2也是甲基化的,这种m7G ppp N m帽子结构具有促进核蛋白体与mRNA的结合、加速翻译起始速度的作用,同时可以增强mRNA的稳定性。在真核mRNA的3\"末端,有一多聚腺苷酸(poly A)结构,通常称为多聚A尾。一般由数十个至一百几十个腺苷酸连接而成。poly A是RNA生成后加上去的。poly A与mRNA从核内向胞质的转位及mRNA的稳定性有关。 DNA双链是反向的,复制时,两股链均作为模板,但新链的合成只能是5"→3"引物提供3"-OH,与原料dNTP的5"-P形成磷酸二酯键,然后DNA聚合酶催化这一聚合反应的进行sirna合成中,以U6启动子为模板,5′端引物与U6启动子5′端互补,3′端引物与U6启动子3′端互补并带siRNA正义链及9nt 的环状结构,二次循环带反义链。引物5"端可设计修饰,3"端是延伸开始,一般不可修饰,也不能形成二级结构。
3, 什么是核酸内切酶?什么是核酸外切酶?两者有什么区别?
简单来说,二者是包含与被包含的关系,即限制性核酸内切酶是核酸内切酶的一种。核酸内切酶:在核酸水解酶中,为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶,与核酸外切酶相对应。从对底物的特异性来看,可分为DNaseⅠ、DNaseⅡ等仅分解DNA的酶;脾脏RNase、RNaseT1等仅分解RNA的酶。如链孢霉的核酸酶就是既分解DNA又分解RNA的酶。一般来说,大都不具碱基特异性,但也有诸如脾脏RNase、RNaseT1等或限制性内切酶那种能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶。限制性核酸内切酶简介:30多年前,当人们在对噬菌体(细菌病毒)的宿主特异性的限制-修饰现象进行研究时,首次发现了限制性内切酶。细菌可以抵御新病毒的入侵,而这种"限制"病毒生存的办法则可归功于细胞内部可摧毁外源DNA的限制性内切酶。首批被发现的限制性内切酶包括来源于大肠杆菌的EcoR I和EcoR II,以及来源于Heamophilus influenzae的Hind II和Hind III。这些酶可在特定位点切开DNA,将基因切割成小的基因片段。当限制性内切酶的应用在上世纪七十年代流传开来的时候,以NEB为代表的许多公司开始寻找更多的限制性内切酶。除了某些病毒以外,限制性内切酶只在原核生物中被发现。核酸外切酶: 核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键,降解核苷酸的酶。其水解的最终产物是单个的核苷酸(DNA为dNTP,RNA为NTP)。按作用的特性差异可以将其分为单链的核酸外切酶和双链的核酸外切酶。核酸外切酶的作用:从核酸链的一端逐个水解下核苷酸。限制性核酸内切酶的作用:识别特定的核苷酸序列,并在DNA分子内部的一定位点切割DNA 。
相关概念
核苷酸
核苷酸(hé gān suān)Nucleotide,一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。又称核甙酸。戊糖与有机碱合成核苷,核苷与磷酸合成核苷酸,4种核苷酸组成核酸。核苷酸主要参与构成核酸,许多单核苷酸也具有多种重要的生物学功能,如与能量代谢有关的三磷酸腺苷(ATP)、脱氢辅酶等。
引物
引物,是指在核苷酸聚合作用起始时,刺激合成的一种具有特定核苷酸序列的大分子,与反应物以共价键形式连接,这样的分子称为引物。引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针合成等。