1, 请教油红O给细胞染色的详细步骤
油红O染色液主要由油红O异丙醇饱和液组成，利用染料易溶于脂质的性质证明组织脂质含量的多少。适用于细胞学与组织学研究的切片观察.但渗透慢，不能长期保存；冰冻切片附贴于载玻片后，立即放入恒冷箱中的固定液固定1分钟后即可染色。？染色后脂滴呈橘红色。下面来了解一下油红O染色步骤有哪些。油红O染色步骤试剂：0.5%的油红O溶液配方（100ml）： 油 红O : 1.5g70%乙醇 ： 50ml丙酮 ： 50ml需要的其他试剂：异丙醇、乙醇、丙酮、苏木素（hematoxylin）染色步骤：1.将冰冻切片（厚度为4-8um）常温干燥15-20min.2.100%异丙醇孵育5分钟（避免把水带入油红O）。3.0.5%的油红O溶液孵育7-8分钟（在60 oC烤箱）4.85%异丙醇溶液洗3分钟5.双脱水洗。6.苏木素染1-1.5min。7.双脱水洗。8.封片剂封片结果： 脂质呈红色或者橘黄色细胞核呈淡蓝色油红O染色步骤注意事项：1 由于脂肪易溶于有机溶剂，所以一般用冰冻切片染色来显示。2 作脂肪染色的冰冻切片不能太薄，过薄的切片常会使脂质丢失。3 苏木素复染时间不能过长。4 染色结果不能长期保存，应尽快观察。以上便是油红O染色步骤，油红O染色常用作染脂肪。脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等。脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。
2, 油红o染色后怎么看含脂滴的肝脏细胞
1、10%中性甲醛的配制材料：中性甲醛（多聚甲醛）密封瓶称取1g中性甲醛粉末，加入10ml的三蒸水中，密封，在60度水浴中过夜才能溶解。配好的溶液1个星期内有效，最好4度保存。2、染色液的配制材料：油红染料棕色可密封瓶异丙醇研钵漏斗定性滤纸称取预先研磨粉碎的0.5g油红干粉，溶于少量异丙醇中，然后加异丙醇至100ml，棕色瓶密封（或锡箔纸包裹避光）4℃保存，为储存液，可长期保存。用时取6ml加三蒸水4ml混匀，定性滤纸过滤，稀释后数小时内用完。3、培养载体3毫升培养瓶。如果培养载体为塑料制品，hoechst33342染核的话，塑料板自发荧光也为蓝色，必须考虑。4、.染色对象间充质细胞脂肪诱导后不同时间段。5、注意事项：脂肪油红染色，有的是动物/人体脂肪组织切片，或细胞爬片。各有操作差异。以下是各论坛方法小结，不全。(1).完全成熟饱满的脂肪细胞，容易破裂，脂滴泄漏，所以压片，切片都要考虑到这个问题。(2).细胞爬片细胞溶液脱落，特别是脂滴大的。操作务要轻柔。不要把细胞冲掉。(3).如果做脂肪组织冰冻切片，冰冻温度比普通要低，切片厚度加厚。6、染色步骤：(1)先小心轻缓倒去培养夜。(2)用pbs轻缓漂洗（不洗没问题）。(3)加10%中性甲醛固定30min（实际固定时间过夜都没问题。固定液用95%酒精也可）。固定的是细胞膜。(4)稀释油红储存液，油红：去离子水=3:2，滤纸过滤，室温放置10min（除去一些杂质，染色结果更清晰）。(5)染色10min左右，加的体积覆盖住板底即可，如6孔加1.5ml,24孔加0.5-1ml（实际染色时间1小时都可以）。(6)脱色，用75%酒精/60%异丙醇漂洗，除去多余的染料（实际用其他平衡液洗也没问题，背景并不会残留多少）。(7)复染，淡苏木染色1/5分钟，pbs漂洗（这一步不做也可，看试验需要，并且苏木素会把胞浆染红，如要显示核，hoechst33342也可以，浓度5微克/毫升染10分钟即可把核染上）。(8)甘油明胶封片（封片后可长期保存）。(9)显微镜观察。
3, 碘酸钾标准溶液的配制及标定
1N Na2S2O3配制：取无水碳酸钠2克，AR?Na2S2O3 260克加煮沸冷蒸馏水使溶解成1000ml。标定：精确吸取配好的1N Na2S2O310ml于100ml容量瓶中，加水稀释到刻度摇匀，倒入25ml滴定管中，另取5ml 0.5N碘酸钾于碘量瓶中，加水约30ml，加入30%KI 7ml,6N HCl 10ml，稍摇，放置暗处10分钟，用上述Na2S2O3滴定，以淀粉为指示剂。计算：CNa2S2O3 = 0.5*5*10ml(Na2S2O3)0.05N Na2S2O3配制：用滴定管将已标定的上述1N Na2S2O3标准溶液50ml放于1000ml容量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀。实际操作依次类推
名词解释
染色
染色又称为上色，指用化学或其他方法影响物质本身而使其着色。天然染色有时需要用媒染剂，合成染色也需要使用一些助剂；通过染色可以使物体呈现出人们所需要的各种颜色，用五颜六色来装点生活。
油红
油红，一种颜色。
异丙醇
IPA（异丙醇）是一种有机化合物，正丙醇的同分异构体，别名二甲基甲醇、2-丙醇，行业中也作IPA。无色透明液体，有似乙醇和丙酮混合物的气味。 溶于水，也溶于醇、醚、苯、氯仿等多数有机溶剂。 异丙醇是重要的化工产品和原料。主要用于制药、化妆品、塑料、香料、涂料等。 2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，使用强酸生产异丙醇在一类致癌物清单中、异丙醇在3类致癌物清单中。
