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5×蛋白上样缓冲液怎么用 SDS上样缓冲液(5*)作用是什么

来源:朵拉利品网  |  2020-12-04 07:48:23

1, SDS上样缓冲液(5*)作用是什么



4*和5*的上样缓冲液的区别就是加样的比例不一样。
4*上样缓冲液使用方法:
1、按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
5*上样缓冲液使用方法:
1. 在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液(5X)。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
2. 按照每4微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液(5X)的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。
3. 100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。
4. 冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5. 通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

3, 5*上样缓冲液 中“5*”是什么意思啊?



4*和5*的上样缓冲液的区别就是加样的比例不一样。
4*上样缓冲液使用方法:
1、按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
5*上样缓冲液使用方法:
1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液(5X)。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液(5X)的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。
3.100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。
4.冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

名词解释


缓冲液

缓冲液是一种能在加入少量酸或碱和水时大大降低pH变动幅度的溶液,弱酸及其盐的混合溶液(如HOAc与NaOAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲液。 其作用是保持溶液PH值的稳定,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响。

蛋白

蛋白又名鸡子白,异名:鸡卵白(《别录》),鸡子清(《食疗本草》)。来源:为雉科动物家鸡的蛋白。动物形态详鸡肉条。

 
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